Attività della transglutaminasi nell'occhio: cross-linking negli epiteli e nelle strutture del tessuto connettivo

Scopo: valutare la distribuzione dell'attività della transglutaminasi (TGasi) nei tessuti oculari e le strutture bersaglio per il cross-linking.

Metodi: sezioni criogeniche di occhi umani e di scimmie cynomolgus sono state incubate con il substrato donatore di ammina biotinilato cadaverina (biotC), che è stato successivamente visualizzato con streptavidina-perossidasi. È stata utilizzata la scansione laser confocale per colocalizzare la biotC e la fibrillina, un componente principale delle microfibrille elastiche e delle fibre zonulari in particolare. Le criosezioni e le zonule bovine isolate sono state trattate con TGasi 2 purificata e biotC. La distribuzione delle diverse TGasi (1, 2, 3 e fattore XIII) è stata confermata mediante immunoistochimica.

Risultati: praticamente tutti i tessuti oculari hanno mostrato attività TGasi con una notevole prevalenza nel corpo ciliare, nelle fibre zonulari e nelle pareti dei vasi sanguigni. La scansione laser confocale ha rivelato che le microfibrille contenenti fibrillina sono il bersaglio principale dell'attività TGasi, in particolare le zonule ciliari. L'epitelio corneale e la membrana basale hanno mostrato un modello di reticolazione TGasi simile a quello della pelle. Il trattamento di criosezioni e fibre zonulari bovine isolate con TGasi 2 purificata ha portato a un'ulteriore incorporazione di biotC nella matrice extracellulare, in particolare nelle fibre zonulari. La TGasi 2 predominante dal punto di vista immunoistochimico era associata all'epitelio e in particolare alle fibre del tessuto connettivo. La TGasi 1 era limitata all'epitelio corneale, mentre il fattore XIII è risultato associato solo ai vasi sanguigni. La TGasi 3 era assente.

Conclusioni: La TGasi 2 sembra essere un importante agente di reticolazione e quindi stabilizzatore del tessuto connettivo oculare. In particolare, le fibre zonulari sono un bersaglio importante per la TGasi 2. Ciò è rilevante nelle microfibrillopatie ereditarie come la sindrome di Marfan, che presenta manifestazioni oculari distintive come bulbo allungato, distacco della retina e sublussazione del cristallino. La TGasi purificata o ricombinante potrebbe avere un uso terapeutico in futuro.